Různé metodické přístupy za účelem snížení exprese podjednotek komplexu I u hmyzích forem <i>Trypanosoma brucei</i>

Abstract

Komplex I (NADH ubichinon oxidoreduktáza) je největší proteinový komplex elektronového transportního řetězce v mitochondrii, ale jeho aktivita není pro T. brucei esenciální. Aplikovali jsme několik genetických metod k vytvoření buněčných linií T. brucei bez komplexu I. Metodické přístupy zahrnovaly i) RNAi pojednotky NDUFA6, ii) knock-out NDUFA6 pomocí CRISPR/Cas9, iii) knock-out podjednotky NUBM pomocí homologní rekombinace. Vytvořené nástroje umožní odhalení role komplexu I v jiných stádiích parazita T. brucei.